Иммуноферментный и масс-спектрометрический методы определения тестостерона и кортизола: сравнительный анализ

ˑ: 

Кандидат химических наук М.А. Дикунец1
Г.А. Дудко1
Доктор химических наук Э.Д. Вирюс1
1Федеральный научный центр физической культуры и спорта, Москва

Цель исследования – провести сравнительный анализ иммуноферментного (ИФА) и масс-спектрометрического методов определения кортизола и тес­тостерона в сыворотке человека.
Методика и организация исследования. Анализ образцов проводили на полуавтоматическом фотометре BTS-350 (BioSystems, Испания) с использованием ИФА наборов и сверхбыстром жидкостном хромато-масс-спектрометре с тройным квадруполем LCMS-8060 (Shimadzu, Япония).
Результаты исследования и выводы. Между результатами количественного определения кортизола и тестостерона в сыворотке сравниваемыми методами выявлена высокая двухсторонняя корреляция. В среднем концентрация кортизола, измеренная фотометрическим методом с использованием твердофазного ИФА, по сравнению с масс-спектрометрическим, была в четыре раза выше. Для обеспечения точности количественного определения стероидных гормонов в сыворотке необходимо применять хромато-масс-спектрометрический метод или предварительно проводить сравнительный анализ используемого метода с хромато-масс-спектрометрическим для определения коэффициента пересчета.

Ключевые слова: кортизол, тестостерон, иммуноферментный анализ, хромато-масс-спектрометрия.

Работа выполнена в рамках государственного задания ФГБУ ФНЦ ВНИИФК № 777-00036-23-01 (тема № 001-22/3).

References

  1. Bjerner J., Bormer O.P., Nustad K. The war on heterophilic antibody interference. Clin. Chem. 2005. 51(1). pp. 9-11.
  2. Horwath O., Apro W., Moberg M., et al. Fiber type-specific hypertrophy and increased capillarization in skeletal muscle following testosterone administration in young women. J. Appl. Physiol. 2020. 128(5). pp. 1240-1250.
  3. Instructions for Use. Cortisol ELISA. Available at: https://www.drg-diagnostics.de/files/eia-1887_ifu--cortisol_2019-05-02_e... (date of access: 02.17.2023).
  4. Ismail A.A.A. A radical approach is needed to eliminate interference from endogenous antibodies in immunoassays. Clin. Chem. 2005. 51(1). pp. 25-26.
  5. Keevil B.G. LC-MS/MS analysis of steroids in the clinical laboratory. Clin. Biochem. 2016. 49(13-14). pp. 989-997.
  6. Ketha S.S., Singh R.J., Ketha H. Role of mass spectrometry in clinical endocrinology. Endocrinol. Metab. Clin. North. Am. 2017. 46(3). pp. 593-613.
  7. Kraemer W.J., Ratamess N.A., Nindl B.C. Recovery responses of testosterone, growth hormone, and IGF-1 after resistance exercise. J. Appl. Physiol. (1985). 2017. 122(3). pp. 549-558.
  8. Kraemer W.J., Ratamess N.A. Hormonal responses and adaptations to resistance exercise and training. Sports Med. 2005. 35(4). pp. 339-361.
  9. Rämson R., Jürimäe J., Jürimäe T., Mäestu J. Behavior of testosterone and cortisol during an intensity-controlled high-volume training period measured by a training task-specific test in men rowers. J. Strength Cond. Res. 2009. 23(2). pp. 645-651.
  10. Viru A., Viru M. Cortisol-essential adaptation hormone in exercise. Int. J. Sports Med. 2004. 25(6). pp. 461-464.